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芍药离体组织培养方法

芍药离体组织培养方法

作者:杏耀娱乐     发布时间:2018-11-19 19:11:36    浏览量:

《芍药组织培养方法来源:中国花卉杂志》作者:何晓迪,日期:2010年6月30日,芍药是我国著名的观赏药用植物。经过几千年的人工栽培和育种,优良芍药品种的雄蕊和雌蕊大多为花瓣状,结实率低,由于异花授粉,没有种子。该方法保持母本性状优良。芍药主要以分株繁殖为主,繁殖系数低,给芍药产业化带来了困难。介绍了芍药离体组织培养的方法:在同一年从单瓣罂粟成熟饱满的种子中选育出芍药种子、胚和子叶,从双瓣罂粟品种中选育出休眠芽。茎尖。在8月、十月、一月和3月分别采集种子并接种。采用1/2MS固体培养基进行遮光处理。当种子的胚根长超过3厘米时,在4天时贮藏在冰箱中30天,然后白天转移到25天,晚上转移到18天。将叶片扩大培养12小时,1500~2000力士。结果表明,种子豌豆应作为种子外植体保存。种皮种子在接种2周后易发生褐变和死亡。少数种子胚根伸长0.5 cm,有生长停滞和逐渐死亡的现象。种皮的去除导致胚乳与种子培养基直接接触,容易引起褐变。未去除种皮的种子在40天内开始分裂并生长胚根。离体生根后,根生长缓慢,3个月后无上胚轴发芽,叶片发育,逐渐褐变死亡。35天后,暴露上胚轴的顶端芽并转移到组织培养室。7天后,子叶的中间芽开始萌发,叶片生长,叶柄20天后伸长。一般来说,种子只展出一片或两片叶子。几个种子形成两个下胚轴并展开三或四个真叶。结果表明,8、10、1月份接种种子成活率较高,生根时间为40~60天。低温处理后,绝大多数种子在打破上胚轴休眠后可使叶片膨胀。Paeonia lactiflora L.的发芽苗生长缓慢。就像自然界中Paeonia lactiflora L.的幼苗一样,只有一片或两片叶子可以连续生长。在5个培养基上,不同时期的无菌苗不能生长和生长。无菌苗移转表观胚轴后,丛生芽不能分化。主要表现在上子叶对不同浓度的BA(细胞分裂素)和GA(赤霉素)不敏感,生长停滞。一些外植体在基部有褐变,一些芽尖和叶逐渐死亡。在1/2MS+BA+0.2NAA(萘乙酸)和1/2MS+0.5BA培养基中培养胚胎和上胚轴,pH值调整为5.8。为了防止褐变,每升添加50至100毫克维生素C,0.3至0.5%活性炭。培养箱温度为25 1,日照强度为2000力士,连续10小时。接种20天后,子叶可离体伸展,胚根略微伸长,但胚不生长,转入不同培养基后结果相同。其原因可能是种子胚乳中存在一些活性物质或胚胎中的一些抑制剂。只有与胚乳和胚根共同生长,合成的启动子或释放抑制剂才能协调内源激素之间的关系,促进胚的生长。低温打破休眠后,下胚轴接种在培养基上。30天后,叶柄伸长,叶片展开,较小,表面收缩,比接种种子不育苗小,易褐变。加入活性炭后,可显著降低褐变污染。幼苗形成后出现生长停滞,含不同激素的培养基变化不明显。假定下胚轴在生长后处于生理休眠状态,休眠解除过程可能需要温度变化过程。在茎尖上培养一些休眠芽,切芽芽茎尖进行实验。另一部分是在九月下旬挖出的,放置在4厘米潮湿的土壤中。5周后取芽。摘除芽鳞,切下茎尖,用0.1%次氯酸钠溶液灭菌15分钟,用无菌水冲洗3~5次,接种于下列三种培养基中:1/2MS+0.5BA+GA2 1/2MS+1.5BA+0.5KT,1/2MS+1.0BA+0.5GA pH 5.6,蔗糖3%,琼脂0.8%,50mg/L维生素n,孵化温度。25摄氏度,每天1, 14小时,2000力士。不同取样时间对茎尖培养有影响。在露地栽培中,从十月到十一月或九月下旬开芽和芽。在4℃冷藏5~6周后,成活率和分化率最高,此时休眠芽萌发和生长迅速,分化植株健壮。采样时间在二月。4℃贮藏8~9周的材料,大部分芽鳞裂开,芽伸长,消毒困难,污染率高。在其它时期,芽的休眠尚未完全解除,芽中存在抑制物质。生长速度慢,成活率低,分化率低。因此,适宜的茎尖培养时间应在10~十一月或4~5~6周。从不同培养基对芽增殖的影响来看,BA和GA组合对芽分化的影响优于BA和KT组合。在1的培养基中芽和叶的数量。5巴+0。5 K T较低,幼苗生长更高。在BA和GA的培养基中,芽、叶数较多,幼苗结实。在继代培养中,用单芽接种外植体,35~40天后在基部形成新芽。然而,随着代数的增加,丛生芽和叶的数量逐渐减少,幼苗生长减弱,一些芽尖和叶枯萎,出现白化苗。第四代基本上变成了玻璃苗和白化病幼苗,browning是严重的。芽增殖的最佳培养基为0.5BA/1.0GA,添加1/2MS。推荐阅读:切花牡丹的栽培管理技术

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