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国兰茎顶组培技术

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作者:杏耀娱乐     发布时间:2018-11-08 12:48:44    浏览量:

组织培养技术资料来源:网络作者:日期:2012年3月15日,华南兰花芽生长期处于高温高湿雨季。混合菌的繁殖猖獗,尤其是在土壤和培养基中。兰花盆栽的接种取样培养基应置于不施有机肥的透光防雨场所。当新芽暴露时,芽应该是裸露的。从植物的根部切出6~13厘米长的新芽。根、赃物和外叶被刮刀清除。彻底清洗后,将材料切成2-3厘米长,在10%次氯酸盐溶液中消毒10分钟。如果载体严重,则采用0 I.1%升汞和饱和漂白粉进行交叉波消毒。灭菌后,用无菌水冲洗多次,置于无菌滤纸上吸收水分,解剖显微镜下无菌取茎尖和腋芽。如果病毒去除的目的是去除病毒,茎尖应小于O.2mm,否则,具有2片叶原基的茎可剥落超过2mm,这有利于存活。(1)原球茎诱导可以诱导兰花各部位组织形成原球茎,然后通过分化培养形成植株。原球茎一旦形成,可连续分裂为继代培养物并增殖,即建立无性系繁殖系。兰花原球茎具有旺盛的生命力和稳定的遗传特性,对兰花的快速繁殖和种质保护十分有利。接种后,外植体在23-25℃的黑暗中培养。1~2月后,可分离出一对乳白色原球茎。在解剖显微镜下观察桑椹状鳞茎,然后变绿。培养后外植体趋于根茎(或树突状团块)。影响兰花原球茎诱导成功的因素有:1。由于遗传类型、内源激素和多酚含量的差异,不同品种在起始阶段具有不同的难度。2、培养基的影响:不同品种对不同培养基的适应性不同。大花蕙兰品种比白+BA、+Na+ 5+C8+ 5和Ba+Ba+NaAI 2好。Xia Hui、Qiu Su等采用MS+Ba0.5+NaA1十活性炭0.5%培养基。初步观察表明,兰属植物适宜于无机盐和氨氮浓度低、生长素含量高的培养基。夏恢、Qiu Su等品种适应于无机盐含量较高、生长素含量较低的培养基。三。芽分化程度和材料类型的影响:在9~13cm时,芽尖萌发率和成活率均高于试芽,成活率最高。4。启动后诱导褐化死亡的效果:果兰品种的茎尖因启动而存活,接种后膨大成桑树状原球茎,成功率高,但启动后易褐变而死亡,这是导致果兰品种褐化失败的原因之一。果兰品种的组织培养。根据四川农业科学院生物技术研究所的数据,褐变死亡人数几乎占3/4。由于兰花芽尖中多酚氧化酶较多,茎尖培养后容易发生褐变和死亡。例如,使用较大的外植体接种,降低培养温度,暗培养,使伤口表面最小化,并在培养基中添加褐变抑制剂(常用的抗氧化剂,如芦丁、柠檬酸等),或者配合应用活性。碳具有减少褐变和死亡的作用。(2)兰花可以通过原球茎分化成植株。热带兰花鳞茎主要为球状,兰属鳞茎丛生(根状茎)。原球茎形成阶段是兰科植物大规模繁殖的有利阶段,是兰科植物快速繁殖和提高增殖率的重要环节。茎尖和侧芽接种3~6个月后,根茎可分为继代培养基和继代培养基。增殖的基本培养基为W和B11,以NaA1-2为培养基的液体培养基是合适的。在旋转床上加入光速培养(1-2转)。每15天更换一次培养基。继代培养3-4次后,用活性炭(0.3%)和柠檬酸(500mg/1)将相同的成分转移到固体培养基中,每月传代一次。液体培养和固体培养交替。在增殖培养中,原球茎的分裂不应该太小;培养群体不应该太少;培养基不应该太多;继代培养时间不应该太长,否则原球茎将不能很好地生长甚至死亡。原球茎可以连续地分割和增殖,从而建立克隆。大花蕙兰原球茎的继代数量和时间有待进一步研究,但继代3~5年的原球茎仍保持正常的增殖和分化能力。推荐阅读:Paeonia lactiflora切花的栽培与管理

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