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日本小叶常春藤组培方法

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作者:杏耀娱乐     发布时间:2018-11-05 23:52:33    浏览量:

日本常春藤叶组织培养方法资料来源:网络作者:日期:2012年6月18日,日本常春藤叶是常春藤的一种耐寒品种。生长健壮,茎叶浓绿,节间短粗,组织饱满,露地越冬性能好。在我居住的扬州地区,它已经被接受了。低温试验温度为0~15摄氏度。霜后茎叶微红,是一种罕见的冬绿垂直绿化材料,具有良好的应用前景。以茎节和叶为外植体进行组织培养无性系的快速繁殖,可有效解决生产和应用过程中种源稀缺、育种率低的矛盾。材料和方法:以多年生日本OBA JoaHuruto多年生茎段茎段和叶片为外植体。在茎节外植体的原代培养中,将材料切成0.5cm厚的片段,将叶外植体切成0.4×0.5cm的正方形。孵化温度为25℃,光照强度为2000 LX,光照时间为12小时/天。茎节外植体的技术和应用具有较高的细菌携带度,但组织发达,因此用中强度杀菌剂70%乙醇0.5分钟+0.1%汞10分钟处理效果较好,污染率为29.2%。0.1%汞升处理时间增加到15分钟,污染率会降低到12.5%,但杀灭率会增加,总存活率会降低,不适合使用。由于茎尖组织嫩,用次氯酸钠处理15分钟后,茎尖褐变死亡率为72.9%,最低强度为5%。进一步降低灭菌强度,可降低死亡率,但污染率增加,在实践中难以控制。因此,外植体的选择应以茎节为基础。原代培养效果与取样时间密切相关。四月初,接种后外植体的发芽率最高,达到82.4%。5月上旬,同年生新梢萌发,细菌载量低,接种后污染率最低,为20.1%。7月底,进入湿热梅雨季后,外植体细菌载量急剧增加,杀菌困难,材料受到污染。染料染色率提高了89.4%。因此,日本常春藤小叶茎节组织培养适宜的外植体采集时间为4月上旬至5月上旬。在组织培养中,添加生长素和细胞分裂素适合于低浓度。6-BA 1 mg/L+2.4-D 0.1 mg/L-1是第一代培养基中最好的培养基。诱导率为90.5%,显著高于其他处理。诱导芽的生长速率达1.2 cm,表现出非常显著的变异水平。在6Ba1 mg/L-1水平下,生长素的比例仍较低。NAA在生长素类中优于2.4-D。在实验范围内,MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.01 mg/L-1的增殖系数较高。叶片愈伤组织被诱导培养,接种后3天叶片变厚变厚。这不仅与6-BA/NAA的相对比(1:3>1:2>1:1)有关,而且与其绝对剂量水平密切相关。综合试验结果表明,MS+6-BA 1 mg/L+NAA 3 mg/L-1最高,达到82.4%。在茎节培养过程中,继代培养后,出现性状变异的个体。相同性状的变异也可用于其它常春藤种中培育新品种。如果能够分离和固定变异性状,扩大育种范围,将是改善其观赏特性的良好途径。组织培养和辐射诱变相结合,对常春藤育种研究有很大帮助。推荐阅读:常春藤马赛克栽培方法防治米兰花卉常见病虫害分析2011年云南景宁市花卉生产规模发展分析:依托生态优势发展花卉产业

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