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芦荟的组织培养方法

芦荟的组织培养方法

作者:杏耀娱乐     发布时间:2018-10-24 23:43:39    浏览量:

《芦荟组织培养方法的来源:网络作者:日期:幼苗繁殖是2012年12月31日芦荟产业的重要组成部分》。芦荟自然繁殖周期长,雌雄花期不同步,种子小而小。传统上,在Aloe vera中使用精细的芽繁殖和根和茎的扦插繁殖。这些方法传播速度慢。每株植物一年只能繁殖十余株,容易积聚病苗,导致芦荟退化。难以满足苗木规模化种植的需要。然而,组织培养和快速繁殖技术不仅可以保持品种的优良特性,而且可以独立于外界条件,实现周年繁殖,在相对短的时间内培育出大量的幼苗。因此,组织培养技术对Aloe Vera的繁殖具有很高的经济价值和广阔的市场前景。

芦荟组织培养主要包括外植体、培养基、植物生长调节剂、添加剂和培养条件的选择。首先是外植体的选择。外植体是从植物组织或器官切割下来的原始身体的小块,用于组织培养。目前,植物组织培养已取得成功。外植体几乎包括植物的所有部分。但同一植物不同植株和不同器官对诱导条件的反应不同,部分诱导成功率高,部分很难去分化,有时即使去分化,再分化的频率也很低。R只分化芽没有根,或只有长根没有芽。因此,外植体的选择是组织培养的重要组成部分。芦荟的组织培养部位主要是茎尖、叶、茎和根。2岁Aloe Vera L.在茎尖和茎段具有较强的再生能力,是理想的外植体材料。诱导不定芽较容易,幼苗变异率低。然而,叶片和根段的分化能力较弱。诱导不定芽作为外植体通常是困难的。此外,叶鞘也可以作为外植体,但成败不仅与芦荟品种有关,还与栽培条件有关。

二是文化媒介的选择。培养基是保存和生长活体植物组织的营养来源。不同的植物有其最适合的组织培养基。适合Aloe Vera的培养基是不同的。对于Aloe arborescens,最佳培养基为MS培养基。然而,在培养过程中,芽和叶尖经常发生脱水,这可能是由于过量的离子引起的。将MS培养基改为1/2MS培养基后,芽生长旺盛,枯萎率显著降低,增殖率增加。

三是植物生长调节剂的使用。芦荟组织培养中,以吲哚丁酸(IBA)和萘乙酸(NAA)为生长素,以6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、玉米素(ZT)和激动素(KT)为细胞分裂素较少。不同种类芦荟和不同部位的外植体也需要不同种类和浓度的生长素。因此,生长调节剂的使用较为复杂,但一般遵循以下规律:生长素和细胞分裂素结合使用芽分化和增殖较好,且大多数生根培养物单独使用IBA或NAA。高浓度的细胞分裂素通常用于促进侧芽形成。在一定浓度范围内,高浓度6-BA可明显促进侧芽形成。随着6-BA浓度的增加,分化芽也增加。6-BA在培养过程中具有一定的积累效应。过量细胞分裂素可抑制新芽的发生和生长,增加培养物变异的可能性。适宜浓度的IBA比NAA更有利于芽的分化和增殖。在相同浓度的6-BA中,IBA比NAA更有效,具有较高的增殖率。幼苗生长旺盛,黄叶和畸形叶片很少出现。如果IBA不加到培养基中或浓度太低,芽就会变薄,不利于移植物的存活。然而,高浓度的IBA显著抑制芽分化。在生根培养基中,IBA的生根效果通常优于NAA。

四是组织添加剂的影响。活性炭可以促进芦荟在组织培养中的生根。活性炭可以从根中吸收有害物质,并用活性炭促进培养基生根。然而,活性炭的浓度不应过高。如果过高,则会吸收外源生长素并抑制生根。一般认为,1mg活性炭可吸收约100g的生长调节剂,且活性炭在不同介质中的吸附能力不同。此外,在培养基中添加腐植酸、香蕉汁和苹果汁,能使腋芽早期萌发,提高腋芽的发芽率和增殖系数,促进组培苗根系发育和叶片生长。

五是组织培养条件的选择。在芦荟的组织培养中,不同的培养条件也有很大的影响。特别要注意pH底物的作用。在培养基中,pH是最重要的。一方面,培养基的pH值在体外器官的形成和发育中起着重要作用,另一方面,它对培养基的生长、分化和硬度有很大的影响。一般来说,在酸性条件下(pH 6.2),不定芽更有利于愈伤组织的形成和不定芽的形成;在中性到酸性条件下(pH 6.2-7.0),不定芽更有利于分化和增殖。

文化中的另一个重要因素是光,包括光强度和光照时间。光照对外植体褐变有一定的影响。在正常条件下,Aloe Vera的组织培养通常在黑暗或弱光条件下进行。如果光太强,外植体容易发生褐变。

温度也是影响Aloe vera组织培养的一个重要因素。芦荟组织培养通常在25℃下进行。过高或过低的温度很容易导致褐变。

还应注意缓蚀剂和吸附剂的应用。Aloe Vera组织培养中最常见的问题是外植体褐变。褐变是由于多酚氧化酶(PPO)氧化成醌,醌呈红棕色,抑制许多酶的活性,影响植物材料的正常生长,导致严重情况下的培养物死亡。Browning受多种因素的影响,包括外植体选择、激素类型和浓度、培养温度、光照时间和强度、培养基类型和pH值。通常,将抑制剂和吸附剂添加到组织培养过程中以减少或避免褐变。常用的抑制剂有VC、半胱氨酸、硝酸银等。其中,硝酸银具有最佳的防褐变效果。当硝酸银浓度为15 mg/L时,抗褐变效果最好。此外,在培养基中加入活性炭也能有效地减少外植体的褐变。

芦荟的组织培养是促进Aloe Vera产业化的重要方面之一。目前,对中国芦荟组织培养技术的研究还不是很深入,尚处于探索阶段。它仅仅局限于对媒介和文化条件的研究,对其作用机制还没有进行更深入的探讨。因此,培训过程中的许多问题还没有得到解释和解决。在芦荟组织培养过程中,包括外植体选择、培养基选择、植物激素配比和培养条件等,每一环节都会对整个组织培养产生影响。目前还没有成熟的方案,远远不能满足工业发展的要求。

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